Aglutinasi adalah agregat sel atau partikel karena pembentukan yang saling terkait. Dasar aglutinasi adalah reaksi imunokimia yang menghasilkan gumpalan partikel atau sel yang dilapisi dengan antigen atau antibodi.
Reaksi aglutinasi adalah reaksi imunologis di mana reaksi antigen dan antibodi spesifik terjadi secara in vitro. Aglutinasi dapat didefinisikan sebagai reaksi penggumpalan di mana rumpun atau agregat terbentuk. Sebagai hasil dari aglutinasi, bentuk-bentuk struktur ikatan-silang disebut “Kisi” yang muncul dalam bentuk agregat yang terlihat.
Reaksi aglutinasi adalah metode yang sensitif, mudah, hemat biaya untuk dilakukan dan tidak memerlukan keterampilan teknis untuk mengoperasikan peralatan canggih. Kisi atau jaringan antigen dan antibodi dapat dilihat secara makroskopis dan mikroskopis tergantung pada jenis reaksi aglutinasi.
Reaksi aglutinasi DIEKSTRUKSI dalam dua fase, yang pertama di mana kontak antigen-antibodi terjadi pada permukaan partikel (atau sel) yang digunakan, dan yang kedua di mana partikel ditambahkan dan partikel dapat divisualisasikan.
Pengertian
Aglutinasi juga adalah fenomena alami yang berhubungan dengan sel darah merah tetapi juga sel darah putih dan trombosit, yang terjadi ketika antibodi hadir dalam plasma mengikat antigen yang dibawa oleh sel darah ini (aglutinasi juga dapat terjadi dengan bakteri yang menjadi sasaran aksi antibodi).
Oleh karena itu, aglutinasi adalah proses yang bersifat imunologis (reaksi antigen-antibodi) dan fisik (modifikasi media). Biasanya dapat dilihat dengan mata kasar ketika datang ke aglutinasi sel darah merah.
Reaksi aglutinasi dapat didefinisikan sebagai reaksi serologis di mana antigen besar atau partikulat dicampur dengan antibodi yang mengandung antiserum dalam dukungan padat seperti sisi kaca, pelat mikrotiter atau tabung reaksi. Aglutinasi antara antigen dan antibodi terjadi ketika kondisi optimal seperti suhu, pH, dan kekuatan ionik larutan.
Pengikatan atau interaksi kedua reaktan, yaitu antigen dan antibodi akan menghasilkan pembentukan jaringan atau kisi antigen-antibodi yang muncul sebagai “gumpalan yang terlihat” oleh mata telanjang. Contoh paling umum dari reaksi aglutinasi adalah “Golongan darah”.
Reaksi Aglutinasi
Aglutinasi adalah ekspresi agregasi antigen dan antibodi yang tampak. Reaksi aglutinasi berlaku untuk antigen uji partikulat yang telah terkonjugasi ke pembawa. Pembawa bisa buatan (seperti partikel lateks atau arang) atau biologis (seperti sel darah merah).
Partikel terkonjugasi ini direaksikan dengan serum pasien yang kemungkinan mengandung antibodi. Titik akhir dari tes ini adalah pengamatan rumpun yang dihasilkan dari pembentukan kompleks antigen-antibodi. Kualitas hasil ditentukan oleh waktu inkubasi dengan sumber antibodi, jumlah dan aviditas antigen yang terkonjugasi ke pembawa, dan kondisi lingkungan pengujian (mis., Konsentrasi pH dan protein). Berbagai metode aglutinasi digunakan dalam imunologi diagnostik dan ini termasuk aglutinasi lateks, tes flokulasi, aglutinasi bakteri langsung, dan hemaglutinasi.
Dalam aglutinasi lateks, banyak molekul antibodi terikat pada manik-manik lateks (partikel), yang meningkatkan jumlah situs pengikatan antigen. Jika sebuah antigen hadir dalam spesimen tes, itu akan mengikat antibodi dan membentuk agregat yang saling terkait. Aglutinasi lateks juga dapat dilakukan dengan antigen yang dikonjugasikan ke manik-manik untuk menguji keberadaan antibodi dalam spesimen serum.
Tes flokulasi dirancang untuk deteksi antibodi dan didasarkan pada interaksi antigen terlarut dengan antibodi, menghasilkan endapan partikel halus yang dapat dilihat dengan mata kasar.
Aglutinasi bakteri langsung menggunakan seluruh patogen sebagai sumber antigen. Ini mengukur tingkat antibodi yang diproduksi oleh inang yang terinfeksi patogen itu. Ikatan antibodi ke antigen permukaan pada bakteri menghasilkan gumpalan yang terlihat.
Hemaglutinasi menggunakan eritrosit sebagai pembawa biologis antigen bakteri, dan polisakarida atau protein yang dimurnikan untuk menentukan keberadaan antibodi yang sesuai dalam spesimen.
Prinsip Reaksi Aglutinasi
Prinsip reaksi aglutinasi didasarkan pada “Clumping of antigen and antibody”. Seperti reaksi presipitasi, itu juga melibatkan pengikatan antigen dan antibodi pada zona kesetaraan, di mana keduanya hadir dalam proporsi yang sama.
Karena antibodi adalah struktur berbentuk-y dan ada dua situs Fab yang terbuat dari “daerah Hypervariable” akan menargetkan penentu antigenik spesifik atau epitop antigen. Ikatan antigen dan antibodi mirip dengan “Model kunci-kunci”. Oleh karena itu, epitop antigen adalah kunci yang cocok dengan celah situs Fab antibodi yang berfungsi sebagai kunci.
Tahapan Aglutinasi
Reaksi aglutinasi melibatkan dua langkah:
- Sensitisasi: Dapat didefinisikan sebagai tahap utama di mana pengikatan antigen dan antibodi berlangsung. Suhu, pH, kekuatan ionik dan periode inkubasi mempengaruhi efisiensi kepekaan atau pengikatan. Sensitisasi bukanlah reaksi yang terlihat.
- Pembentukan kisi: Ini dapat didefinisikan sebagai tahap sekunder di mana antibodi dan antigen multivalen membentuk jaringan Stabil disebut sebagai “Kisi”. Kisi adalah konfigurasi seperti jaring yang terdiri dari jaringan antara antigen peka dan antibodi. Dibutuhkan banyak waktu untuk terjadi daripada kepekaan. Kisi adalah reaksi yang terlihat.
Jenis Reaksi Aglutinasi
Berdasarkan sifat antigen, reaksi aglutinasi terdiri dari dua jenis yaitu aglutinasi aktif dan pasif.
Aglutinasi aktif
Ini melibatkan interaksi langsung dari antibodi yang ada dalam serum dengan antigen partikulat yang membawa epitop yang menarik. Aglutinasi aktif digunakan untuk mengukur antibodi terhadap antigen partikulat seperti sel darah merah, mikroorganisme patogen seperti bakteri, jamur, dll.
Dalam metode ini pertama-tama, tambahkan antigen partikulat ke dalam sumur pelat mikrotiter. Kemudian, encerkan antibodi secara serial dan tambahkan ke sumur yang dilapisi dengan antigen. Dengan meningkatkan konsentrasi antibodi, laju aglutinasi juga akan meningkat.
- Hasil positif: Antibodi yang ada dalam serum akan berikatan dengan antigen partikulat sebagai hasil dari mana bentuk antigen-antibodi yang mengendap di bagian bawah sumur.
- Hasil negatif: Terjadi karena adanya jumlah antibodi yang tidak cukup untuk menggumpalkan antigen. Karenanya, reaksi aglutinasi tidak akan terjadi. Dalam hal ini, alih-alih menggumpal antigen muncul sebagai “Pelet” di bagian bawah sumur.
Contoh: Tes aglutinasi slide (pengelompokan darah), tes Widal untuk diagnosis demam tifoid, tes Coomb untuk mendeteksi antibodi anti-Rh dll.
Aglutinasi pasif
Ini melibatkan interaksi tidak langsung dari antibodi dengan antigen terlarut melalui partikel pembawa.
Aglutinasi pasif pertama, terdiri dari pengikatan antigen yang dapat larut dengan matriks pembawa seperti lateks manik, polistirena, dll. Dalam jenis ini, antigen tidak membawa epitop yang menarik yang harus diaglutinasi.
Ada jenis lain, di mana antigen, antibodi yang dikenal menempel dengan matriks pembawa disebut sebagai aglutinasi pasif terbalik. Dan setelah perlekatan antibodi dengan molekul pembawa, antigen menempel ke situs Fab antibodi untuk menggumpalkannya.
Contoh: Aglutinasi manik lateks untuk antigen dan antibodi.
Kegunaan
Tes aglutinasi secara luas berlaku di bidang Mikrobiologi Klinik, di mana beberapa aplikasi diberikan di bawah ini:
- Golongan darah penerima dan donor pada saat transfusi darah.
- Membantu dalam mendeteksi keberadaan antibodi dan untuk mengukur jumlah antibodi yang ada dalam darah pasien.
- Aglutinasi aktif membantu serodiagnosis Toxoplasmosis, brucellosis dll.
- Aglutinasi pasif membantu dalam penentuan faktor-Rh
- Banyak digunakan dalam teknik seperti lateks dan hemaglutinasi.
- Membantu mendeteksi jenis antigen dan mengukur jumlah antigen yang ada dalam darah pasien.
Kesimpulan
Oleh karena itu, aktif dan pasif adalah dua jenis aglutinasi utama berdasarkan sifat antigen. Selain pasif aktif, pasif, dan terbalik, ada jenis lain yang disebut “Aglutinasi Lain-Lain”. Ketika penggumpalan terjadi antara antibodi terhadap antigen partikulat yang berbeda tetapi organisme terkait akan merujuk sebagai “Aglutinasi silang”.
Aglutinasi yang terjadi antara antigen dari organisme yang terkait secara biologis dengan antibodi spesifik yang terkait dengan kelompok tersebut akan disebut sebagai “Aglutinasi kelompok”. Penggumpalan unsur antigenik partikulat dengan sel darah seperti sel darah merah dalam pembuluh darah akan disebut sebagai “aglutinasi intravaskular”.