Teknik Faust adalah metodologi yang memungkinkan konsentrasi beberapa telur dan / atau larva parasit yang terdapat pada tinja oleh mengambang. Ini digunakan ketika tes tinja langsung negatif atau ketika Anda ingin mendapatkan sampel bersih yang bebas dari detritus.
Metode konsentrasi untuk pemeriksaan koproparasitologi terdiri dari tiga jenis: dengan flotasi, dengan sedimentasi atau dengan metode yang menggabungkan dua metode sebelumnya. Metode ini meningkatkan kemungkinan hasil positif.
Analisis tinja.
Metode Faust terdiri dari pencampuran bagian sampel tinja dengan zat yang lebih padat dari telur atau parasit yang akan dipekatkan. Ini menyebabkan, karena kurang padat, mereka mengapung di permukaan. Cairan supernatan dikumpulkan dan dilihat di bawah mikroskop untuk identifikasi dan kuantifikasi.
Metode ini digunakan untuk memvisualisasikan telur cacing. Pada saat yang sama, telah terbukti menjadi metode yang sangat sensitif untuk diagnosis Giardia lamblia , protozoa berflagel yang tersebar luas di seluruh dunia. Metode flotasi tidak dianjurkan untuk telur parasit yang sangat berat seperti cacing pita dan trematoda.
Parasit adalah salah satu infeksi usus yang paling luas di seluruh dunia, terutama di negara-negara miskin dengan tindakan sanitasi yang buruk. Untuk alasan ini, memiliki metode sensitif untuk mengidentifikasi dan mengukur parasit ini sangat berguna untuk diagnosis dan pengobatan.
Indeks artikel
Fondasi dan bahan
Teknik ini didasarkan pada adanya perbedaan berat jenis telur, parasit, kista, larva dan detritus, menggunakan larutan seng sulfat sebagai metode flotasi.
Dasar pemikiran teknik ini adalah untuk mencampur sampel dengan larutan seng sulfat yang memiliki densitas lebih tinggi daripada telur, larva, atau parasit yang lebih ringan.
Hal ini memungkinkan unsur-unsur yang lebih berat mengendap dan unsur-unsur yang lebih ringan mengapung yang muncul di supernatan setelah sentrifugasi sampel.
bahan
Wadah untuk pengambilan sampel tinja (Sumber: Bobjgalindo [CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)] melalui Wikimedia Commons)
– Siapkan larutan seng sulfat dengan densitas 1,18 atau 1,2 g/ml jika sampel diberi perlakuan sebelumnya.
– Siapkan rak dengan tabung reaksi yang sudah diberi label sebelumnya.
– Memiliki mesin sentrifugal.
– Siapkan slide mikroskop dan kaca penutup. Semua harus diberi label
– Pastikan bahwa larutan Lugol tersedia untuk menodai seprai.
– Memiliki kain kasa untuk menyaring.
– Memiliki corong dan air suling.
– Temukan wadah plastik atau kardus berlabel.
– Juga aplikator dan gagang steril 5 mm.
– Pemantik untuk mensterilkan pegangan.
Langkah
Pemeriksaan makroskopis dan mikroskopis
Untuk setiap pemeriksaan tinja, pemeriksaan dimulai dengan apa yang disebut “pemeriksaan kotor” sampel.
Konsistensi, warna, adanya apa yang tampak seperti darah, adanya lendir, dan adanya parasit dewasa dijelaskan.
Kemudian kita melanjutkan ke “pemeriksaan mikroskopis” tinja, ini tergantung pada metodenya. Yang paling sederhana adalah metode apusan langsung, yang merupakan metode pengamatan mikroskopis parasit yang paling sederhana.
Foto pengamatan Gardia lamblia, parasit usus (Sumber: Riddlemaster [CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0)] melalui Wikimedia Commons)
Prosedur ini melibatkan menempatkan sejumlah kecil sampel langsung pada slide. Tempatkan beberapa tetes larutan garam yang ukurannya harus sama dengan sampel. Campur larutan garam dengan tinja sampai campuran homogen terbentuk. Letakkan kaca penutup dan periksa di bawah mikroskop.
Teknik Faust Asli
Prosedur kedua terdiri dari metode flotasi Faust, versi aslinya terdiri dari:
1- Tempatkan sekitar dua gram feses dalam wadah yang sesuai untuk tujuan ini.
2- Tambahkan 30 ml larutan flotasi seng sulfat yang dibuat emulsi dengan mencampurkan larutan dengan feses.
3- Saring dengan saringan logam ke dalam wadah kedua dan pindahkan ke tabung reaksi.
4- Tambahkan lebih banyak larutan flotasi sampai terbentuk meniskus di dalam tabung.
5- Tempatkan kaca penutup pada meniskus. Biarkan istirahat selama 10 sampai 15 menit.
6- Lepaskan kaca penutup dan letakkan pada kaca objek yang akan diperiksa di bawah mikroskop.
Teknik Faust dengan sentrifugasi
Awalnya metode ini tidak menggunakan sentrifugasi, tetapi sekarang dimasukkan karena diperoleh hasil yang lebih baik. Teknik ini melibatkan serangkaian langkah untuk mencapai prosedur yang tepat, ini adalah sebagai berikut:
1- Feses dicuci dengan air, diaduk rata kemudian disaring dengan kain kasa yang dilipat empat. Sampel dimasukkan ke dalam tabung reaksi.
2- Centrifuge dan buang supernatannya (sampel yang disimpan di atas air). Langkah 1 dan 2 diulangi sampai supernatan “jernih”.
3- Seng sulfat ditambahkan ke sampel yang disaring dan disentrifugasi.
4- Ini bercampur dengan baik.
5- Centrifuge lagi selama 1 menit pada 2500 rpm (putaran per menit).
6- Supernatan diperoleh kembali dengan loop steril sekitar 5 mm; tabung tidak boleh dikocok.
7- Sampel yang diperoleh dari supernatan ditempatkan pada kaca objek dan setetes Lugol dapat ditempatkan untuk diwarnai, kaca penutup ditempatkan dan diamati di bawah mikroskop.
8- Wadah dan tabung reaksi diberi label.
Keuntungan
– Unsur yang digunakan untuk diagnosis dapat terlihat bersih dan tanpa “detritus”, hal ini memudahkan pengamatan lembar dan mengurangi waktu yang digunakan untuk diagnosis.
– Dalam supernatan, baik larva, telur dan/atau kista ditemukan.
– Ini adalah metode biaya yang sangat rendah.
– Prosedurnya sangat sederhana dan mudah diterapkan.
– Diagnosis cepat dan akurat.
– Karena pentingnya dan tingginya insiden parasitosis di negara-negara miskin, metode berbiaya rendah dan mudah digunakan ini ideal untuk diagnosis dan pemantauan patologi ini.
Kekurangan
Kepadatan larutan flotasi menghasilkan kontraksi larva, yaitu mereka menyusut dan, dalam waktu yang sangat singkat, dapat berubah bentuk. Ini memaksa pemeriksa untuk membuat diagnosis segera dan sampel yang dirawat tidak dapat disimpan untuk pemeriksaan di masa mendatang.
Seperti semua metode identifikasi mikroskopis, staf pemeriksa yang sangat berpengalaman diperlukan untuk membuat diagnosis yang akurat.
Deformasi cepat dari unsur yang diperlukan untuk diagnosis, meskipun merupakan kerugian yang jelas, dapat dikoreksi dengan melakukan pengamatan mikroskopis segera.
Referensi
- Ananias, FL (2017). Evaluasi sensitivitas metode Faust dan sedimentasi spontan untuk diagnosis giardiasis. Jurnal Kedokteran Tropis Kuba , 68 (2).
- Bartlett, MS, Harper, K., Smith, N., Verbanac, P., & Smith, JW (1978). Evaluasi komparatif dari teknik flotasi seng sulfat yang dimodifikasi. Jurnal mikrobiologi klinis , 7 (6), 524-528.
- Becker, AC, Kraemer, A., Epe, C., & Strube, C. (2016). Sensitivitas dan efisiensi metode koproskopik yang dipilih — sedimentasi, kombinasi sedimentasi-flotasi seng sulfat, dan metode McMaster. Penelitian parasitologi , 115 (7), 2581-2587.
- Garcia, LS, Arrowood, M., Kokoskin, E., Paltridge, GP, Pillai, DR, Procop, GW,… & Visvesvara, G. (2018). Diagnosis laboratorium parasit dari saluran pencernaan. Ulasan mikrobiologi klinis , 31 (1), e00025-17.
- Summers, WA (1942). Modifikasi metode flotasi sentrifugal seng sulfat untuk pemulihan telur cacing dalam tinja yang diformalkan. Jurnal Parasitologi , 28 (4), 345-346.