smear adalah alat diagnostik untuk tuberkulosis paru aktif. Ini adalah teknik laboratorium yang memungkinkan deteksi dan pengukuran basil tahan asam seperti Mycobacterium tuberculosis . Ini adalah metode yang paling banyak digunakan di seluruh dunia untuk membuat diagnosis TB paru aktif di masyarakat dan untuk mengevaluasi manfaat pengobatan.
Tuberkulosis paru adalah penyakit menular yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis yang menginfeksi paru tetapi dapat menyerang organ dan sistem lain. Di seluruh dunia, lebih dari 6 juta orang menderita tuberkulosis paru (TB).
Sel M. tuberculosis dalam apusan dahak (Sumber: Microrao / CC BY-SA (https://creativecommons.org/licenses/by-sa/4.0) melalui Wikimedia Commons)
Mycobacterium tuberculosis dan spesies Mycobacterium non-TB lainnya memiliki lapisan lipid pada dinding sel yang kaya akan asam mikolat, yang tahan terhadap perubahan warna alkohol asam setelah pewarnaan dengan pewarna dasar.
Untuk alasan ini, metode pewarnaan khusus seperti metode Ziehl-Neelsen digunakan. Metode sederhana dan murah ini memungkinkan dinding untuk mempertahankan noda ketika sampel dibilas dengan larutan asam, dan dinding Mycobacterium berubah menjadi merah dibandingkan dengan bakteri lain yang bernoda biru.
Untuk melakukan smear microscopy membutuhkan sampel dahak yang diambil sebaiknya pada pagi hari saat bangun tidur. Sampel jaringan atau sampel cairan tubuh juga dapat digunakan.
Indeks artikel
Proses
Sampel yang akan diproses untuk pemeriksaan mikroskopis apus adalah sampel sputum, sampel jaringan, atau sampel cairan tubuh. Sampel jaringan dapat diambil dengan bronkoskopi atau dengan biopsi kelenjar getah bening atau jaringan lain.
Karena TBC dapat mempengaruhi organ atau sistem apa pun, sampelnya bisa sangat bervariasi, termasuk: sampel urin, cairan serebrospinal , cairan pleura, cairan asites, darah, nanah dari rongga terbuka, biopsi, dll.
Sampel lesi ekstrapulmoner juga harus diproses untuk kultur. Sampel dahak dikumpulkan di pagi hari ketika Anda bangun.
Beberapa sampel dapat dikumpulkan secara berturut-turut atau dalam beberapa hari berturut-turut. Sampel harus diberi label dalam botol tertutup dan bermulut lebar. Mereka harus memiliki data pasien, jenis sampel dan tanggal pengambilan sampel.
Prosedur teknis
– Setelah sampel diperoleh, dapat disentrifugasi untuk dipekatkan atau digunakan secara langsung. Prosedur awal terdiri dari menempatkan beberapa tetes sampel dan menyebarkannya pada slide mikroskop.
– Sampel ditutup dengan fuchsin yang telah disaring (larutan pewarnaan).
– Kemudian dipanaskan sampai diperoleh sekitar tiga emisi uap keputihan.
– Tunggu lima menit hingga sampel menjadi dingin dan cuci dengan air.
– Ditutup dengan larutan pemutih (asam alkohol) selama 2 menit.
– Dicuci lagi dengan air.
– Sampel ditutup dengan metilen biru dan didiamkan selama satu menit.
– Bilas dengan air.
– Biarkan mengering di udara dan lanjutkan pengamatan di bawah mikroskop.
Foto dari mikroskop (Gambar oleh Konstantin Kolosov di www.pixabay.com)
Prosedur ini cepat, sederhana, murah dan memungkinkan sel-sel Mycobacterium tuberculosis menjadi berwarna merah . Teknik ini disebut teknik pewarnaan Ziehl-Neelsen.
Pengamatan mikroskopis terdiri dari identifikasi keberadaan basil tahan asam dan kuantifikasinya berdasarkan lapangan.
Sel Mycobacterium tuberculosis muncul sebagai batang melengkung merah, granular, dengan latar belakang biru. Mereka dapat diisolasi, dipasangkan atau dikelompokkan. Pengamatan harus dilakukan di lapangan dan setidaknya 100 bidang harus diperiksa untuk setiap apusan.
Hasilnya dianggap positif bila ada, di setiap bidang, lebih dari 10 sel M. tuberculosis . Ini sesuai dengan 5.000 hingga 100.000 basil untuk setiap mililiter sampel.
Dalam kasus ini, itu dianggap positif untuk Mycobacterium tuberculosis , karena non-TB Mycobacterium atau bakteri tahan asam lainnya memiliki bentuk yang berbeda dan umumnya jumlah diamati per bidang kurang dari 10.
Orang yang memeriksa sampel harus memiliki pengalaman atau keahlian dalam mendeteksi dan mengenali mikroorganisme ini, karena hasil negatif palsu atau positif palsu mungkin ada.
Ada teknik fluoroskopi lain yang lebih sensitif, tetapi jauh lebih mahal. Salah satu teknik tersebut menggunakan pewarnaan Auramine-O, untuk mendapatkan fluoresensi hijau, atau pewarnaan Auramine O / Rhodamin B, untuk mengamati fluoresensi kuning / oranye.
Kasus positif umumnya dilakukan untuk kultur dan antibiogram untuk memastikan diagnosis dan pemilihan pengobatan yang tepat.
Untuk apa mikroskopis smear?
Tuberkulosis adalah penyakit menular yang mempengaruhi paru-paru dan organ lain serta sistem organ tubuh. Ini adalah penyakit menular yang menyebabkan cedera serius pada sistem pernapasan yang jika tidak ditangani dengan benar, dapat menyebabkan kematian pasien.
Tuberkulosis ditularkan hampir secara eksklusif melalui tetesan udara dari dahak pasien yang terinfeksi tuberkulosis paru. Tetesan kecil ini dapat tetap berada di udara dan memiliki kemampuan untuk menginfeksi orang yang menghirupnya.
Sel M. tuberculosis (Sumber: NIAID / CC BY (https://creativecommons.org/licenses/by/2.0) melalui Wikimedia Commons)
Infeksi memerlukan waktu kontak yang lama dengan pasien yang terinfeksi yang terus-menerus mengeluarkan basil di lingkungan yang berventilasi buruk. Orang dengan imunodefisiensi lebih mungkin untuk terinfeksi.
Pasien HIV-positif lebih mungkin daripada populasi lainnya untuk mengembangkan infeksi pernapasan yang serius, termasuk tuberkulosis paru. Oleh karena itu pentingnya pemeriksaan mikroskopis sebagai metode diagnostik yang cepat dan murah untuk tuberkulosis.
Pemeriksaan mikroskopis memungkinkan diagnosis bakteriologis tuberkulosis dibuat, namun, hasil positif harus dikonfirmasi dengan penelitian lain.
Studi yang mengkonfirmasi diagnosis tuberkulosis termasuk pemeriksaan radiologis yang menunjukkan gambaran ciri-ciri lobus atas paru-paru, tes tuberkulin positif, dan kultur spesimen positif.
Smear negatif
Pemeriksaan mikroskopis apusan negatif tidak serta merta menyingkirkan diagnosis tuberkulosis, karena terutama bila sampelnya adalah sputum, eliminasi basil tidak konstan. Untuk alasan ini, dalam kasus ini, ketika diagnosis dicurigai, sampel serial diperlukan.
Pemeriksaan mikroskopis positif
Sebuah mikroskop smear positif merupakan indikasi tuberkulosis dan harus dikonfirmasi dengan studi pelengkap lainnya. Bila hasilnya positif, kultur dan antibiogram harus dilakukan.
Setelah pengobatan ditetapkan, penurunan skala positif mikroskopis apusan yang berkelanjutan sampai diperoleh hasil negatif, memungkinkan untuk mengontrol manfaat pengobatan.
Referensi
- Azis, MA (2002). Penilaian kualitas eksternal untuk AFB smear mikroskop.
- Desikan, P. (2013). Pemeriksaan mikroskopis dahak pada tuberkulosis: apakah masih relevan?. Jurnal penelitian medis India , 137 (3), 442.
- Fauci, AS, Kasper, DL, Hauser, SL, Jameson, JL, & Loscalzo, J. (2012). Prinsip Harrison tentang penyakit dalam (Vol. 2012). DL Longo (Ed.). New York: Mcgraw-hill.
- Ngabonziza, JCS, Ssengooba, W., Mutua, F., Torrea, G., Dushime, A., Gasana, M.,… & Muvunyi, CM (2016). Kinerja diagnostik mikroskopis smear dan hasil tambahan Xpert dalam deteksi tuberkulosis paru di Rwanda. Penyakit menular BMC , 16 (1), 660.
- Sardiñas, M., García, G., Rosario, MM, Diaz, R., & Mederos, LM (2016). Pentingnya pengendalian mutu bacilloscopy di laboratorium yang melakukan diagnosis tuberkulosis. Jurnal Infeksi Cile: Organ Resmi Perhimpunan Infekologi Cile , 33 (3), 282-286.
- Sequeira de Latini, MD, & Barrera, L. (2008). Pedoman diagnosis bakteriologis tuberkulosis: standar dan pedoman teknis: bagian 1 mikroskopis apusan. Dalam Manual untuk diagnosis bakteriologis tuberkulosis: standar dan panduan teknis: bagian 1 mikroskopis apusan (hlm. 64-64).