Tes silang: untuk apa, teknik, alasan, fase

crossmatch sejumlah penelitian laboratorium dilakukan untuk menentukan apakah produk darah dari donor (terutama seluruh darah dan dikemas globular) yang kompatibel dengan darah penerima.

Ini adalah tes pelengkap selain kompatibilitas ABO dan faktor Rh. Alasan untuk pencocokan silang adalah bahwa kadang-kadang dua individu (pendonor-penerima) mungkin memiliki kelompok ABO dan Rh yang sama tetapi darah mereka tetap tidak cocok.

Sumber: unsplash.com

Ketidakcocokan tersebut disebabkan oleh adanya antibodi terhadap serangkaian protein sel darah merah yang dikenal sebagai antigen minor. Antigen ini tidak diuji secara rutin seperti untuk golongan darah (ABO) dan faktor Rh.

Ini karena antigen minor jauh lebih jarang dan memiliki ekspresi variabel pada setiap individu, oleh karena itu hampir tidak mungkin untuk mengelompokkannya ke dalam kategori seperti yang dilakukan dengan kelompok dan faktor Rh.

Sebagai gantinya, sel darah merah donor dicampur dengan serum pasien (uji kecocokan mayor) dan sel darah merah pasien dengan serum donor (uji kecocokan minor) untuk mendeteksi adanya reaksi antigen-antibodi.

Bila terdapat antibodi terhadap antigen minor, baik dalam serum pasien atau donor, tes tersebut dikatakan positif, sehingga dalam banyak kasus unit darah tertentu tidak dapat ditransfusikan.

Indeks artikel

Grup ABO

Untuk memahami sepenuhnya tentang apa itu reaksi silang, pertama-tama Anda perlu mengetahui dasar-dasar tentang golongan darah.

Dalam pengertian ini, yang terpenting adalah mengetahui bahwa darah dapat diklasifikasikan menjadi empat golongan: A, B, AB, dan O.

Masing-masing kelompok ini mengekspresikan pada permukaan sel darah merah protein tertentu (antigen), yang diidentifikasi sebagai unsur asing oleh antibodi dari reseptor potensial dari kelompok yang berbeda.

Hal yang paling mencolok tentang reaksi antigen-antibodi dalam pencocokan darah adalah bahwa tidak diperlukan paparan antigen sebelumnya agar antibodi ada. Ini dikenal sebagai antibodi alami.

Antibodi alami

Umumnya, agar ada antibodi dalam tubuh seseorang, sel darah putih yang sama harus sudah terpapar antigen sebelumnya.

Ini berarti bahwa pada kontak pertama antara antigen asing dan organisme tidak ada antibodi, karena antibodi ini dihasilkan kemudian, setelah kontak awal. Oleh karena itu, sistem kekebalan tidak mungkin memiliki antibodi terhadap, misalnya, virus tertentu, jika belum pernah terpapar virus tersebut di masa lalu.

Satu-satunya pengecualian di atas adalah antigen anti-AB. Dalam kasus ini, orang tersebut memiliki antibodi terhadap antigen yang tidak dimiliki sel darah merahnya, meskipun mereka tidak pernah bersentuhan dengan sel darah merah orang lain. Ini dikenal sebagai antibodi alami.

Antigen dan antibodi yang terkait dengan golongan darah

Golongan darah ditentukan dalam kasus sistem ABO dengan adanya antigen spesifik (A atau B) pada membran sel darah merah dan, sebaliknya, antibodi terhadap antigen yang tidak ada pada membran eritrosit.

Jadi, seseorang dengan golongan darah A mengekspresikan antigen A pada permukaan sel darah merahnya, sementara ada antibodi anti-B dalam serum.

Sebaliknya, pada pasien kelompok B ditemukan antigen B sedangkan antibodinya adalah anti-A.

Sekarang, pasien dengan darah AB memiliki antigen A dan B. Oleh karena itu, tidak ada antibodi karena hal itu akan menghancurkan sel darah merah orang tersebut.

Hal sebaliknya terjadi pada kelompok O, di mana membran eritrosit tidak menunjukkan salah satu dari dua antigen (baik A maupun B), sedangkan dalam serum terdapat antibodi anti-A dan anti-B.

Ketidakcocokan grup ABO

Dari uraian di atas, kompatibilitas golongan darah ABO dapat dengan mudah disimpulkan, karena mengetahui antigen membran eritrosit secara otomatis mengetahui antibodi dalam serum. Sehingga:

– Darah A kompatibel dengan grup A dan grup O.

– Golongan darah B kompatibel dengan darah B dan O.

– Orang dengan golongan O hanya dapat menerima darah O (karena mereka memiliki antibodi anti-A dan anti-B), meskipun darah mereka diterima oleh semua golongan lain tanpa masalah karena kekurangan antigen.

– Akhirnya. mereka yang bergolongan darah AB dapat menerima darah dari semua golongan lain (A, B, O dan tentu saja AB), karena mereka tidak memiliki antibodi terhadap antigen mana pun. Namun, hanya orang dalam kelompok AB yang dapat menerima darah AB, karena semua kelompok lain memiliki antibodi yang akan menghancurkan sel darah merah ini.

antigen kecil

Seperti halnya kelompok ABO, serangkaian protein dapat ditemukan pada permukaan eritrosit yang berfungsi sebagai antigen dengan cara yang sama seperti antigen kelompok ABO.

Namun, antigen ini tidak ada pada semua individu. Kombinasi mereka heterogen dan penetrasi (tingkat ekspresi protein) adalah variabel, oleh karena itu klasifikasi ke dalam kelompok seperti yang ada untuk ABO dan Rh tidak mungkin. Oleh karena itu namanya berasal dari “antigen minor”, juga dikenal sebagai “antigen insiden rendah”.

Meskipun tidak sering, mungkin ada antibodi alami terhadap antigen minor. Di antara mereka yang paling umum adalah Lewis, MNSs, anti N, Kell, Duffy, anti Fyb dan Kidd. Semuanya bertanggung jawab atas reaksi hemolitik dan pasca transfusi yang sangat serius.

Selain itu, mungkin ada kasus sensitisasi terhadap antigen minor melalui kontak sebelumnya, baik dengan protein antigenik tersebut karena transfusi sebelumnya atau karena kekebalan silang.

kekebalan silang

Dikatakan bahwa ada kekebalan silang ketika dua antigen dari dua sumber yang berbeda (misalnya sel darah merah dan bakteri) sangat mirip, sampai-sampai antibodi terhadap salah satu protein antigenik ini juga bereaksi dengan yang lain karena mereka hampir identik.

Untuk memahami ini lebih baik, ambil contoh hipotetis sebelumnya (antigen dari sel darah merah dan bakteri). Dalam kedua kasus tersebut tidak ada antibodi alami, tetapi jika seseorang terpapar bakteri, mereka akan menghasilkan antibodi untuk melawannya.

Antibodi tersebut nantinya akan bereaksi terhadap sel darah merah jika antigennya sangat mirip dengan bakteri yang menginduksi pembentukan antibodi.

Jika ini terjadi, sel darah merah dengan protein antigenik tertentu tidak dapat diberikan kepada orang yang memiliki antibodi, karena akan terjadi penolakan. Di sinilah letak pentingnya reaksi silang.

Untuk apa crossmatching?

Karena tidak mungkin mengelompokkan darah individu yang berbeda berdasarkan antigen minor, satu-satunya cara untuk mengetahui apakah ada antibodi terhadap antigen minor sel darah merah orang lain dalam darah satu orang adalah melalui pencocokan silang..

Dalam kasus di mana antibodi hadir, reaksi hemolisis atau aglutinasi dipicu, itulah sebabnya disimpulkan bahwa reaksi itu positif; yaitu, terdapat antibodi terhadap antigen minor (walaupun tidak diketahui secara pasti yang mana). Jika tidak, tesnya negatif.

Dasar

Crossmatches didasarkan pada reaksi antigen-antibodi. Oleh karena itu, dengan mereka dimungkinkan untuk mendeteksi apakah ada antibodi dalam serum penerima terhadap antigen sel darah merah donor (atau sebaliknya), yang memicu reaksi antigen-antibodi.

Jika tidak ada antibodi, tidak ada reaksi yang terjadi dan tes dilaporkan negatif. Sebaliknya, jika reaksi positif (terjadi hemolisis atau aglutinasi selama pengujian) dapat disimpulkan bahwa antibodi ada.

Dalam pengertian ini, penting untuk dicatat bahwa mungkin ada antibodi terhadap sel darah merah baik dalam serum donor maupun resipien. Inilah sebabnya mengapa ada dua jenis reaksi silang.

Jenis-jenis reaksi silang

Antibodi terhadap eritrosit donor mungkin ada dalam serum pasien; tetapi dapat juga terjadi sebaliknya, yaitu antibodi dalam serum pendonor terhadap sel darah merah pasien.

Itulah mengapa ada dua jenis crossmatch:

– Pertandingan silang utama.

– Crossmatch kecil.

Kedua jenis ini secara rutin dilakukan di bank darah sebelum mentransfusikan produk darah, karena jika salah satu tesnya positif, ada risiko tinggi reaksi transfusi yang dapat membahayakan nyawa pasien.

Pertandingan silang utama

Tes ini menilai apakah serum penerima mengandung antibodi terhadap sel darah merah donor.

Jika ini terjadi, produk darah tidak dapat diberikan, karena sejumlah besar antibodi yang ada dalam plasma pasien akan menghancurkan sel darah merah donor dengan sangat cepat, menghasilkan reaksi bencana dalam tubuh penerima dalam prosesnya. Reaksi-reaksi ini sangat parah sehingga dapat mengancam jiwa.

Crossmatch kecil

Dalam hal ini, ditentukan apakah ada antibodi terhadap sel darah merah penerima dalam serum donor.

Jika demikian, antibodi akan mulai menghancurkan eritrosit penerima. Namun, karena jumlah antibodi terbatas, reaksinya kurang intens; meskipun masih berbahaya.

Fase

Crossmatch mayor dan minor dibagi menjadi tiga fase:

– garam.

– Termal atau inkubasi.

– Coombs.

Pada fase pertama sel darah merah dan serum dicampur dalam larutan garam. Selanjutnya, albumin ditambahkan, dan sampel diinkubasi pada suhu 37ºC selama 30 menit untuk akhirnya melanjutkan ke fase coombs.

Teknik

Teknik crossmatch relatif mudah, karena melibatkan penambahan sel darah merah donor ke serum pasien (major crossmatch) serta eritrosit resipien ke serum donor (minor crossmatch).

Untuk menginduksi reaksi antigen-antibodi dalam waktu yang relatif singkat, serangkaian langkah standar harus diikuti. Langkah-langkah ini diringkas secara sederhana di bawah ini.

Penting untuk dicatat bahwa bagian selanjutnya menjelaskan tes kompatibilitas mayor, meskipun langkah-langkahnya sama untuk tes kompatibilitas minor, tetapi bertukar asal sel darah merah dan serum.

Fase salin

– Tambahkan ke tabung reaksi 2 tetes serum dari penerima (dari donor jika crossmatch minor).

– Ambil sampel sel darah merah dari donor (dari penerima jika crossmatch minor).

– Cuci dan sentrifus sel darah merah.

– Disuspensikan kembali dalam larutan antara 3% dan 5%.

– Tempatkan setetes larutan ini dalam tabung yang berisi serum penerima.

– Campur dengan lembut.

– Sentrifugal.

– Baca hasilnya di lampu display.

Fase termal

– Tambahkan 2 tetes albumin 22% ke dalam tabung dimana fase salin telah selesai.

– Inkubasi pada suhu 37ºC selama 30 menit.

– Sentrifugasi selama 15 detik.

– Baca hasilnya di lampu display.

Fase Coombs

– Ambil sel dari tabung dan cuci dengan larutan garam.

– Buang supernatannya.

– Tambahkan dua tetes reagen Coombs.

– Campur dengan lembut.

– Centrifuge selama 15 hingga 30 detik.

– Resuspensi sel dan evaluasi di lampu penglihatan untuk aglutinasi atau hemolisis.

Jika ada aglutinasi atau hemolisis di salah satu fase, hasilnya dianggap positif.

Referensi

  1. Hall, TC, Pattenden, C., Hollobone, C., Pollard, C., & Dennison, AR (2013). Kebijakan transfusi darah dalam bedah umum elektif: bagaimana mengoptimalkan rasio cross-match-to-transfusi. Pengobatan Transfusi dan Hemoterapi , 40 (1), 27-31.
  2. Silvergleid, AJ, Wells, RF, Hafleigh, EB, Korn, G., Kellner, JJ, & Grumet, FC (1978). Uji kompatibilitas menggunakan sel darah merah berlabel 51Chromium pada pasien positif crossmatch. Transfusi , 18 (1), 8-14.
  3. Kulkarni, N., Ali, M., Haray, PN, Yusuf, A., & Masoud, A. (2006). Sistem Pencocokan Silang Elektronik. Apakah Pencocokan Darah Pra-Operatif Rutin untuk Reseksi Kolorektal Diperlukan Lagi?. Endoskopi , 38 (11), Poster_50.
  4. Sembuhkan, JM, Blumberg, N., & Masel, D. (1987). Evaluasi pencocokan silang, pencocokan HLA, dan ABO untuk transfusi trombosit pada pasien refrakter. Darah , 70 (1), 23-30.
  5. Arslan,. (2006). Pencocokan silang elektronik. Ulasan obat transfusi , 20 (1), 75-79.
  6. Wu, KK, Hoak, JC, Koepke, JA, & Thompson, JS (1977). Pemilihan donor trombosit yang kompatibel: evaluasi prospektif dari tiga teknik pencocokan silang. Transfusi , 17 (6), 638-643.
  7. Schonewille, H., Zijl, AMV, & Wijermans, PW (2003). Pentingnya antibodi terhadap antigen RBC insiden rendah dalam pencocokan silang lengkap dan singkat. Transfusi , 43 (7), 939-944.